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    酶標儀與分光光度計是一回事嗎?

    放大字體  縮小字體 發布日期:2024-03-27
    核心提示: ​​酶標儀的工作原理及結構01由酶聯免疫吸附實驗法可知,酶標儀應該用比色法來分析抗原或抗體的含量,即它應依
     ​​

    酶標儀的工作原理及結構


    01

    由酶聯免疫吸附實驗法可知,酶標儀應該用比色法來分析抗原或抗體的含量,即它應依照比色原理進行工作。實際上,酶標儀就是一臺變相的光電比色計或分光光度計其基本工作原理與主要結構和光電比色計幾乎相同。圖1是一種單通道、自動進樣的酶標儀的工作原理圖。

     

    圖1  一種酶標儀光路系統

     

    光源燈發出的光線經過濾光片或單色器后,成為一束單色光束。該單色光束經過塑料微孔板中的待測標本,被標本吸收掉一部分后,到達光電檢測器。光電檢測器將投射到其上面的光信號的強弱變成電信號的大小。此電信號經前置放大、對數放大、模數轉換等模擬信號處理后,送入微處理器進行數據處理和計算。最后由顯示器和打印機將測試結果顯示、打印出來。

     

    微處理機還通過控制電路來控制X、Y方向的機械驅動機構的運動。但對于非自動型的酶標儀,它是用手工來移動微孔板的,可以省去X、Y方向的機械驅動機構及其電路,這樣的儀器體積更小,結構也更簡單。

     

    微孔板是一種用來盛裝待測樣本的透明塑料板,板上有多排小孔,如有40孔板、55孔板和96孔板等多種規格。每個小孔可以盛放零點幾毫升的溶液。根據儀器的不同,既可以一個孔一個孔地檢測,也可以一排孔一排孔地檢測。

     

    酶標儀既可以使用和分光光度計相同的單色器,也可以使用干涉濾光片來獲得單色光。和光電比色計一樣,使用濾光片作過濾裝置時,將濾光片設計到微孔板的前面和后面效果是一樣的

     

    光源燈發出的光,經過聚光鏡、光闌后,到達反射鏡,經反射鏡作90°反射后,垂直通過比色液,然后再經濾光片到達光電管


    一般酶標儀的光束既可以設計成從上到下通過比色液,也可以設計成從下到上通過比色。

     

    酶標儀有單通道和多通道兩種類型,單通道又分為自動型和手動型兩種。其中,自動型的儀器設有X和Y兩個方向的驅動機構,在機械裝置的驅動下,微孔板上的小孔一個個依次進入光束下面測試。手動型靠手移動微孔板來進行測量。

     

    在單通道酶標儀的基礎上,又發展了多通道、全自動型酶標儀。多通道酶標儀一般都是自動型的,它設有多個光束和多個光電檢測器。如8通道的儀器,設有8條光束(或8個光源)、8個檢測器和8個放大器。在機械驅動裝置的作用下,樣品被8個一排、8個一排檢測。多通道酶標儀的檢測速度快,但其結構比較復雜,價格也較貴,多用于大中型醫院。

     

    酶標儀的其他部分的結構,與光電比色計和小型生化分析儀基本相同。


    區別


    02

     

    酶標儀和普通光電比色計的不同之處在于:


    1)盛裝比色液的容器不是使用比色皿,而是使用了塑料微孔板,塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作,之所以采用塑料微孔板來作固相載體,是利用它對抗原或抗體有較強的吸附這一特點;


    2)酶標儀的光束是垂直通過待測液的;


    3)酶標儀通常不使用A而是使用光密度OD來表示吸光度。


    酶標儀和分光光度計的主要區別是什么呢?具體差別體現在以下三個方面:

     

    1)盛裝待測溶液的容器:分光光度計用的是比色皿,酶標儀使用的是塑料微孔板(酶標板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個比色皿一次只能盛裝一種溶液

     

    酶標板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標板通常為48孔或96孔,每個微孔可以盛裝不同的溶液

     

    2)光路的方向:分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路。由于酶標板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。

     

    垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平、酶標板透光性、孔底是否平整等的影響較大。

     

    3)光路的長度:由于光密度(OD值)與吸光系數,待測組分的濃度以及光路長度正比關系

     

    分光光度計采用的比色杯的寬度通常是1cm,所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器,不同批次測量的數據具有同樣的可比性。

     

    酶標儀采用的是垂直光路,所以光路的長度應該是液體液面的高度,所以測得的值受到樣品的體積的影響

    編輯:songjiajie2010

     
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