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    絕對(duì)干貨—微生物日常檢驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)!

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2017-03-24  來(lái)源:食品實(shí)驗(yàn)室服務(wù)公眾號(hào)
    核心提示:微生物檢驗(yàn)過(guò)程中的細(xì)節(jié)問(wèn)題匯總。。。
    一、培養(yǎng)基的滅菌及使用

    (1)每次配置時(shí),要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開(kāi)瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。
    (2)培養(yǎng)基配置時(shí),稱量要準(zhǔn)確,包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。
    (3)一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長(zhǎng)時(shí)間放置,更不可隔夜。
    (4)滅菌時(shí)要保證恒溫、恒壓,同時(shí)要保證有效滅菌時(shí)間。
    (5)滅菌過(guò)的培養(yǎng)基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過(guò) 3 天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。
    (6)在使用時(shí),要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),然后及時(shí)調(diào)低水域溫度(先化好的可從水域取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬(wàn)不可長(zhǎng)時(shí)間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。
    (7)做產(chǎn)品微生物檢測(cè)時(shí),傾倒培養(yǎng)基溫度在 45℃左右,不可過(guò)燙,避免將菌燙死;也不可過(guò)涼,化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固,不便于觀察結(jié)果。
    (8)每瓶培養(yǎng)基均要做空白。
    (9)盡量集中做樣,避免頻繁打開(kāi)同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,增大培養(yǎng)基的污染幾率,出現(xiàn)誤差結(jié)果。
    (10)培養(yǎng)基剩余過(guò)少時(shí),可先將其傾倒成空白用板。

    二、 做樣環(huán)境的維持

    (1)大環(huán)境(房間)
    1)做樣時(shí),窗戶和空調(diào)要關(guān)閉,或用酒精對(duì)房間進(jìn)行噴霧消毒,避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境(最好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無(wú)菌間進(jìn)行操作)。
    2)如果在原來(lái)的原料微生物檢測(cè)室進(jìn)行做樣,要定期開(kāi)啟紫外燈,對(duì)房間進(jìn)行殺菌。
    (2)小環(huán)境(超凈臺(tái))
    1)定期清潔初效過(guò)濾器,要及時(shí)更換。
    2)做樣前,將超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清潔,用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,并提前半小時(shí)將超凈臺(tái)紫外燈打開(kāi),對(duì)超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌。
    3)關(guān)紫外燈,開(kāi)風(fēng)機(jī),調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量,風(fēng)量不可過(guò)低。
    4)每次做樣后,要對(duì)超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清理、清潔,并用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。
    5)紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時(shí)更換。
    6)做樣同時(shí),要做上相應(yīng)菌落檢測(cè)的環(huán)境空白。
    7)做樣區(qū)域的選擇:
    a、一般在距離超凈臺(tái)外沿的 1/3-2/3 區(qū)域進(jìn)行無(wú)菌操作;
    b、要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作。

    三、 工器具的潔凈度

    (1)玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌。
    (2)做樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用,不可與其它操作器具混用,使用時(shí),先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進(jìn)行滅菌。
    (3)接種針(環(huán))采用灼燒方式進(jìn)行滅菌,但要注意做樣時(shí)要先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻。

    四、樣品的采集及檢測(cè)

    (1)保證采樣器具的無(wú)菌性
    1)玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,保證恒溫、時(shí)間足夠(但不可時(shí)間過(guò)長(zhǎng),導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報(bào)廢)。
    2)取樣筐:使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒。
    3)取樣勺:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。
    4)取樣袋:可先用酒精進(jìn)行擦拭消毒,再在超凈臺(tái)用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。
    5)電子稱表面用 75%酒精消毒。
    (2)人員操作
    1)保證手部的清洗、消毒:取樣前及做樣前都要先洗手再消毒。
    2)取樣要具有代表性(隨機(jī)樣、目的樣、綜合樣)且要標(biāo)示清楚。
    3)取樣完畢,不可在車間逗留,要及時(shí)將樣品放入超凈臺(tái),對(duì)其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒。
    4)在要求的做樣區(qū)域進(jìn)行操作。
    5)做樣前,要用 75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒,再開(kāi)口。
    6)往鹽水瓶加樣品時(shí),要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
    7)樣品計(jì)量要準(zhǔn)確,稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確(1mL 吸管不允許將管口敲掉),進(jìn)行 100 倍稀釋時(shí),1mL 吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品從管壁流下去,同時(shí)要避免將管底部捅破。
    8)鹽水溫度以 40℃左右為宜,不能過(guò)熱,會(huì)將部分微生物燙死;也不能溫度太低,不能將樣品溶解完全。
    9)進(jìn)行稀釋時(shí),要搖勻,保證溶液的均一性。
    10)傾倒平皿時(shí),要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養(yǎng)基要適量,不可以太少,在培養(yǎng)過(guò)程中干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右為宜。
    11)做大腸菌群樣時(shí),要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好,放入超凈臺(tái)對(duì)外表面進(jìn)行紫外線滅菌。
    12)接二步時(shí),要注意先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻,避免出現(xiàn)接不上菌落的情況發(fā)生,導(dǎo)致無(wú)法判斷、確認(rèn)。
    13)做樣完畢,及時(shí)放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),并清理清潔超凈臺(tái)。

    五、 微生物的培養(yǎng)

    (1)在培養(yǎng)過(guò)程中,要隨時(shí)監(jiān)控培養(yǎng)箱溫度,保證其在適宜的溫度進(jìn)行培養(yǎng)。
    (2)要按照《微生物檢驗(yàn)規(guī)范》要求及時(shí)觀察結(jié)果,出現(xiàn)異常,要及時(shí)分析原因進(jìn)行反饋。
    編輯:songjiajie2010

     
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