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    菌落總數能力驗證,真的簡單嗎?

    放大字體  縮小字體 發布日期:2020-09-07
    核心提示:菌落總數的測定方法,看似非常簡單,但由于食品種類繁多,食品中可能存在的微生物菌群較多,要在同等條件下把所有的細菌培養出來
     菌落總數的測定方法,看似非常簡單,但由于食品種類繁多,食品中可能存在的微生物菌群較多,要在同等條件下把所有的細菌培養出來,反應樣品的真實情況,實屬不易。

     


    菌總計數容易會出現哪些問題呢?

     

    1、在營養成分單一、保存條件苛刻的食品(水、水產品等)中,微生物復蘇、生長緩慢,培養48h計數時容易遺漏

    2、一些食品處理后,仍存在類似菌落的顆粒狀雜質,很難判斷是菌落還是雜質

    3、一些食品容易污染變形桿菌等運動性較強的蔓延菌,培養后無法計數。

     

    關鍵是,能力驗證是考察實驗室檢驗能力的外部質量活動,組織方提供試驗樣本,在菌落總數項目上,一般會考慮增加上述難度

     

    防止蔓延的方法有哪些?


     

     

    No.1 增加覆蓋一層瓊脂培養基

    蔓延菌大多為需氧菌,覆蓋一層瓊脂的目的是隔絕空氣,降低需氧菌生長速度。

    No.2 添加TTC

    TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),不僅可以使菌落產生紅色,便于辨識,也可部分地抑制大片蔓延菌落的形成。

    No.3 陶瓦蓋代替平皿蓋

    用陶瓦蓋代替平皿蓋,可有效去除培養基表面水分,阻止細菌移動,有效抑制蔓延。傾注培養基凝固后,用陶瓦蓋(干熱滅菌)代替平皿蓋,正置放入培養箱培養。


    以上三種方法哪種最好呢?


    👉真相大揭秘


     

    方法:我們分別采用PCA直接傾注法、覆蓋一層培養基法、TTC法、用陶瓦蓋代替平皿蓋法對同一樣本進行菌落總數計數。其中,TTC培養基冷卻至56℃左右加0.5%的TTC溶液(1mL/100mL)。陶瓦蓋法平皿正置放入培養箱培養。

    從6小時開始觀察菌落生長情況并計數,以后每隔12小時觀察1次。

    結  果

     

    PCA直接傾注法菌落生長相對較快,培養24h,菌落數已達到峰值,其他方法平板培養36h或48h后,達到峰值。

    添加TTC的平板菌落生長相對比較緩慢,且培養到最后,菌落依然比較小,但總體檢出數值較高。其原因是TTC平板能將部分細小菌落,或生長于瓊脂內部、顏色與平板顏色相近,肉眼不易觀察的菌落計出。

    有圖有真相



    單因素方差分析,P>0.05(95%置信度),四種試驗計數結果并無顯著差異。按照微生物能力驗證的數據統計分析原則,當Z≤2時方為滿意結果。因此雖然方法之間數據差異不大,但有必要提高檢驗技術,將結果控制在最準確的數值范圍之內,才能保證在能力驗證評價中取得滿意結果。

    編輯:songjiajie2010

     
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