一、拿樣/取樣

拿樣：已有人取好樣品，放在一個固定的地方，檢測員每天上班后，拿好一個干凈的密閉容器，去把樣品拿回實驗室，期間注意樣品被污染。

取樣：也叫抽樣，需要自己去取/抽，去成品庫取成品，去車間現場取半成品、接觸面、非接觸面、水、冰、內包袋、空氣、輔料等。無菌取樣，熟悉取樣方法、流程，帶好取樣工器具，做好樣品標識。取完樣，放在干凈密閉的容器，帶回實驗室，做好樣品登記。

二、無菌室滅菌

一般采用紫外燈滅菌。實驗室前、后打開紫外燈照射30分鐘。注意實驗前關燈后30min方可進入室內工作。很多人分不清無菌室和超凈工作臺的使用和區別，本人理解：無菌室是用來做樣品前增菌的，超凈工作臺是用來做致病菌分離和特征/可疑菌落的進一步驗證的。

三、配制培養基和相關試劑

現在用的干粉培養基較多，按照檢測方法需要的培養基，買回來就行；用過的廠家有：北京陸橋、青島海博和廣州環凱。按照樣品數量配制相應的培養基，也可以多配點，放著冷藏保存，有效期7天。干粉培養基保質期一般是3年，開封后1年，一年一瓶都用不了的，稀少。配制培養基的水，一般選擇單蒸水。

培養基一般選擇濕熱滅菌法，稱量好干粉培養基，加入相應的單蒸水，攪拌溶解后分裝，塞上瓶塞或試管塞，用報紙或牛皮紙包扎好，橡皮筋捆好，放入高壓滅菌鍋。現在有些實驗室是手提式滅菌鍋，需要手動排氣，人工計時，看壓力表，比較累。   

培養皿和吸管：一般選擇干熱滅菌，可我工作過的幾個實驗室，干燥箱基本是用來干燥的（使用溫度高容易壞，滅菌時間太久不想等待），也可以不用外校。培養皿和吸管包扎好后，放入高壓滅菌鍋滅菌。

培養基、培養皿、吸管等，滅好菌后，需冷卻；然后通過傳遞窗搬進無菌室。

四、無菌室增菌

采樣注意部位和代表性，一般采取可食部位。致病菌采樣部位視具體樣品而定。注意交叉污染。現在一般采用拍打式均質器。

五、做好標識

每個實驗室標識最好是統一的做法，這樣大家都能認識，把增菌好的試管和瓶子，通過傳遞窗拿到培養室放進相應的培養箱進行培養。

六、整理無菌室

做完實驗，需要把無菌室整理好，工器具擺好位置，臺面做好清潔衛生。打開紫外燈滅菌30分鐘。

七、影響微生物檢測結果的因素

7.1 人 上崗培訓，熟悉檢測方法；

7.2 機 儀器設備正常運行，定時維護保養；

7.3 料 材料正確，有效；

7.4 法 檢測方法適合樣品檢測要求；

7.5 環 環境滿足微生物檢測要求。

八、微生物檢測的幾點看法

8.1 資質證書：今年取消的食品檢驗工資格考試，而且每個省份，每個行業要求不一樣，最好是邊工作邊考證。進入工作崗位，工作能力比證書重要。

8.2  熟悉檢驗方法，下載現行有效的版本，食品伙伴網提供免費下載。

8.3  25g稱樣量的波動范圍，GB4789標準中沒有明確，美國《微生物實驗室指南》中提到：a.溫度的波動范圍是±1℃；b.重量和容量的波動范圍是±1%；在該指南的第4.09章沙門氏菌檢驗中又指出：除特別規定，方法中所有指標的波動范圍是±2%。據此推理，25g稱樣量的波動范圍在±0.5g以內是合適的。

8.4  儀器計量  溫度、重量，壓力等影響實驗結果的儀器需要外校，同時實驗室需要內校，溫度用水銀溫度計內校，重量用標準砝碼內校。一般外校的有效期是1年，高壓滅菌鍋的壓力表是半年。

8.5 參加培訓，多學習肯定是好的。

8.6 有條件的，每年至少參加一次外部能力驗證，檢驗一下實驗室的檢測結果準確度，同時提升實驗室的可信度，外部審核或客戶驗廠，都會問能力驗證這塊。如果有并且獲得滿意結果，回答時的底氣都足些。

好了，今天的分享就到這里，歡迎小伙伴們踴躍投稿，分享自己在檢測過程中的經驗。