指在微生物實驗工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關措施。

（二）無菌環境

無菌室

無菌柜

超凈工作臺

1、無菌室

（1）無菌室的結構：更衣間、緩沖間、操作間

（2）無菌室的消毒和防污染

每日（使用前）紫外線照射（1~2小時）.

每周用甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸（2小時）.

每月用新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。

2、超凈工作臺

超凈臺的使用與保養:

（1）風速保持在0.32-0.48米/秒;

（2）使用前開啟紫外燈照射30分鐘以上;

（3）讓超凈臺預工作10~15分鐘;

（4）使用完畢后，用70%酒精將臺面和臺內四周擦拭干凈.

（三）無菌器材

滅菌器材：玻璃器皿、培養基、無菌衣等.

消毒器材：無菌室內的凳子、試管架、天平、工作臺、手等

（四）無菌操作

1、目的：

（1）是保證待檢物品不被環境中微生物的污染；

（2）是防止被檢微生物在操作中污染環境或感染操作人員。

2、進入無菌室前的準備

（1）定期檢查無菌環境的空氣是否符合規定；

（2）用紫外線滅菌處理30~60分鐘；

（3）檢查無菌器材是否完備；

（4）洗手消毒；

（5）手部消毒后，再穿戴無菌工作服。

3、檢驗操作過程的無菌操作要求

（1）在操作中不應有大幅度或快速的動作；

（2）使用玻璃器皿應輕取輕放。

（3）在正火焰上方操作；

（4）接種用具在使用前、后都必須灼燒滅菌；

（5）在接種培養物時，協作應輕、準。

（6）不能用嘴直接吸吹吸管。

（7）帶有菌液的吸管、玻片等器材應及時置于盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒。

斜面接種時的無菌操作

(1)接種滅菌 (2)開啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好塞子