小反芻獸疫(PPR),也稱羊瘟,是由副黏病毒科麻疹病毒屬小反芻獸疫病毒(PPRV)引起的,以發熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征的急性接觸性傳染病,山羊和綿羊易感,且山羊發病率和病死率均較高。世界動物衛生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,我國將其列為一類動物疫病。除山羊外,PPR感染并不具有明顯的臨床癥狀,加之其傳播迅速,病程較短,因此快速確定疫情并采取有效的防控措施,對于保護地區經濟,保護養戶生產經營熱情具有重要意義。
根據《小反芻獸疫防治技術規范》要求,病原學診斷是PPR確診的重要依據,推薦的方法包括病毒的細胞分離鑒定、聚合酶鏈式反應(PCR)和酶聯免疫吸附試驗(ELISA),檢測條件為生物安全三級實驗室(BSL-Ⅲ)。限于實驗器材和技術難度,上述均方法無法在生產現場開展。由此而發生的采樣、送檢、結果報告等過程時滯,對于疫情控制亦造成了不可避免的延誤。
核酸恒溫擴增技術的成熟發展催生了現場分子診斷方法。以基因試紙卡為例,該技術融合了核酸診斷方法的靈敏特異及試紙法判讀的簡單方便,僅需恒溫裝置和低速離心機即可完成全部操作,對檢測環境無限制要求且不產生任何生物污染。基因試紙卡實現了核酸診斷技術的現場化使用,在疫病凈化、引種篩查及生產、加工現場檢疫等方面具有廣闊的應用前景。
利用現場分子診斷技術,結合流行病學分析,當動物出現口腔炎癥癥狀、呼吸道癥狀等PPR早期癥狀,即可對其口鼻拭子進行基因試紙卡檢測。基因試紙卡的易操作、低成本,以及特異性和靈敏性,為PPR的早發現、早確診提供了有力的工具。