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    超全面的檢測作業指導書,實驗室工作的你一定用的到!

    放大字體  縮小字體 發布日期:2021-06-23
    核心提示:感官檢驗作業指導書各種產品的感官檢驗基本包含組織狀態、色澤、氣味、滋味是否正常,有無異物,液體樣品有無分層及渾濁現象,粉
     感官檢驗作業指導書

    各種產品的感官檢驗基本包含組織狀態、色澤、氣味、滋味是否正常,有無異物,液體樣品有無分層及渾濁現象,粉狀樣品有無水濕、結塊,有無霉變、腐敗變質等現象。

    在感官檢驗時同時要檢驗產品的生產日期、保質期、凈含量等。

     

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    理化檢驗作業指導書

    (一)化學試劑

    化學試劑根據用途分為:一般試劑、基礎試劑、高純試劑、色譜試劑、生化試劑、光譜純試劑和指示劑等。一般用于食品檢驗的有一般試劑、基礎試劑、高純試劑和專用試劑。

    基礎試劑:可用作基準物質的試劑叫做基準試劑,也可稱為標準試劑。基礎準試劑可用來直接配制標準溶液,用來校正或標定其他化學試劑。如在配置標準溶液時用于標定標準溶液用的基準物。

    化學試劑的儲存:

    (1)化學試劑大多數都具有毒性及危害性,要加強管理。

    (2)隔離存放:易燃類、劇毒類、強腐蝕性類、低溫貯存的等分類放置;要求化驗人員有一定的相關知識。

    (3)一般存放于通風、陰涼、溫度低于30℃的藥品柜中。

    有些藥品遇光容易分解,避光保存。固體、液體、酸、堿分別放置。

     

    (二)儀器和器皿

    (1)檢驗所用的儀器應處于正常狀態,要符合精度要求;同時高級的精密儀器要由經過專業培訓的人員或專業技術人員操作,不可在未弄清使用方法前動用儀器。

    (2)儀器因經常使用,檢測性能會逐漸降低,所以測試儀器要定期檢定和校準。

    (3)一般的玻璃器皿采用一次計量。可以是送到法定的計量單位進行計量,也可以送一套到法定的計量單位進行計量,然后用這套計量好的容器對本企業生產中使用的容器進行自校準。玻璃儀器的計量一定要結合本企業的實際情況合理進行校正,并不是所有的儀器都要送檢,但作為判定數據使用的器皿一定要計量。

     

    (三)溶液的配制

    1.標準溶液的配制

    配制標準溶液用水,應符合GB/T 6682-2008的要求。

    所用試劑純度應在分析純以上。標定所用的基準試劑應為容量分析工作中使用的基準試劑。

    所用分析天平及砝碼應定期檢定。

    所用滴定管、容量瓶及移液管均需定期校正。

    制備標準溶液的溫度系指20℃時的濃度。

    標定標準溶液時,平行試驗不得少于8次,兩人各作4次平行測定,檢測結果按規定的方法進行數據的取舍后取平均值,濃度值取4位有效數字。

    凡規定用“標定”和“比較”兩種方法測定濃度時,不得略去其中任何一種。濃度值以標定結果為準。

    配制濃度等于或低于0.02 mol/L的標準溶液時,應于臨用前將濃度高的標準溶液用煮沸并冷卻了純水稀釋,必要時重新標定。

    碘量法反應時,溶液溫度不能過高,一般在15-20℃之間進行。

    滴定分析用標準溶液在常溫(15-25℃)下,保存時間一般不得超過2個月。


    標準溶液配制的分類:

    有直接配制法和標定法兩種。

    (1)直接配制法

    在分析天平上準確稱以一定量的已干燥的基準物(基準試劑)溶于純水后,轉入已校正的容量瓶中,用純水稀釋至刻度,搖勻即可。

    (2)標定法

    很多試劑并不符合基準物的條件,例如市售的濃鹽酸中HCL很易揮發,固體氫氧化鈉很易吸收空氣中的水分二氧化碳,高錳酸鉀不易提純而易分解等。因此它們都不能直接配制標準溶液。一般暗先將這些物質配成近似所需濃度的溶液,再用基準物測定其準確濃度。這一操作稱為標定。


    配制溶液注意事項

    配制溶液的蒸餾水一定要達到規定標準,防止水中雜質影響實驗結果。

    稱量要準

    特別是在配制標準溶液時,稱取標準物質的量要準確到小數點后第四位,稱取的試劑要毫無損失地轉移到容量瓶內,定容要準確。作為檢驗人員要學會看懂標準要求,如標準上寫著“準確稱取”或“精確到0.0001g、0.001g”的要求,就要準確稱取到相應的精度要求;同時在稱取過程中盡量減少中間變更的容器。

    配制標準溶液時,需要干燥的試劑或基準物(根據標準中的具體要求)一定要進行烘干后方可使用,而且要在烘干后盡快使用。

    每瓶試劑溶液必須有標明名稱、濃度和配制日期的標簽,標準溶液的標簽還應標明標定日期、標定者。

    溶液要用帶塞的試劑瓶盛裝。見光易分解的溶液要裝于棕色瓶中,揮發性試劑、見空氣易變質及放出腐蝕性氣體的溶液,瓶塞要嚴密。濃堿液應用塑料瓶裝,如裝在玻璃瓶中,要用橡皮塞緊,不能用玻璃磨口塞。

    配制硫酸、磷酸、硝酸等溶液時,都應把酸倒入水中,對于溶解時放熱較多的試劑,不可在試劑瓶中配制,以免炸裂。

    不能用手接觸腐蝕性及有劇毒的溶液。劇毒溶液應先作解毒處理,不可直接倒入下水道。

     

    (四)樣品的理化檢驗

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    微生物作業指導書


    (一)樣品的采集

    1.采樣目的

    確保采集的樣品能代表全部被檢驗的物質,使檢驗分析更具代表性。

    2.采樣原則

    采集的樣品要有代表性,采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環境衛生狀況等進行詳細調查,檢查是否有污染源存在,同時能反映全部被檢食品的組成、質量和衛生狀況。

    應設法保持樣品原有微生物狀況,在進行檢驗前不得污染,不發生變化。

    采樣必須遵循無菌操作程,容器必須滅菌,避免環境中微生物污染,容器不得使用煤酚皂溶液,新潔爾滅、酒精等消毒物滅菌,更不能含有此類消毒藥物,以避免殺掉樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可使用。

    3.采樣數量

    取樣數量的確定,應考慮分析項目的要求、分析方法的要求及被檢物的均勻程度三個因素。樣品應一式兩份,分別供檢驗、復檢使用,每份樣品數量一般不少于200g。

    根據不同種類采樣數量略有不同,實驗室檢驗樣品一般為25克。

    4.采樣方法

    采取隨機抽樣的方式。

    直接食用的小包裝食品,盡可能取原包裝,直到檢驗前不要開封,以防污染。

    如為非冷藏易腐食品,應迅速將所采樣品冷卻至0-4℃。

    不要使樣品過度潮濕,以防食品中固有的細菌增殖。

    在將冷凍食品送到實驗室前,要始終保持樣品處于冷凍狀態。樣品一旦融化,不可使其再凍,保持冷卻即可。

    5.樣品的保存和運送

    樣品采集完后,應迅速送往實驗室檢驗,送檢過程中一般不超過3h,如路程較遠,可保存在1-5℃環境中,如需冷凍者,則在冷凍狀態下送檢。

    冷凍樣品應存放在-15℃以下冰箱內;冷卻和易腐食品應存放在0-5℃冰箱或冷卻庫內;其它食品可放在常溫冷暗處。

    運送冷凍和易腐食品應在包裝容器內加適量的冷卻劑或冷凍劑。保證途中樣品不升溫或不融化。

    待檢樣品存放時間一般不應超過36小時。


    (二)檢驗樣品的制備

    樣品的全部制備過程均應遵循無菌操作程序。

    檢驗冷凍樣品前應先使其融化。可在0-4℃融化,時間不超過18小時,也可在溫度不超過45℃的環境中融化,時間不超過15分鐘。

    檢驗液體或半固體樣品前應先將其充分搖勻。如容器已裝滿,可迅速翻轉25次;如未裝滿,可于7s內以30cm的幅度搖動25次。從混樣到檢驗間隔時間不應超過3分鐘。

    開啟樣品包裝前,先將表面擦干凈,然后用75%乙醇消毒開啟部位及其周圍。

    非粘性液體樣品可用吸管吸取一定量,然后加入適量的稀釋液或培養基內,吸管插入樣品內的深度不應超過2.5cm,也不得將吸有樣品的吸管浸入稀釋液或培養基內。

    粘性液體樣品可用滅菌容器稱取一定量,然后加入適量的稀釋液或培養基。

    固體或半固體樣品可用滅菌的均質杯稱取一定量,再加適量的稀釋液或培養基進行均質,從樣品的均質到稀釋和接種,相隔時間不應超過15分鐘,或是在無菌生理鹽水里放入玻璃珠,充分振蕩搖勻。


    (三)檢驗

    實驗室收到樣品后或是自己取樣后,首先進行外觀檢驗,及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗,檢驗過程中要認真、負責,嚴格進行無菌操作,避免環境中微生物污染。

    檢驗所使用的稀釋液、試劑、培養基接觸的一切器皿必須經過有效的滅菌。

    實驗室所用儀器、設備的性能應定期檢查和校正。

    制備試劑和培養基所用的水,應為無離子水或用玻璃器皿蒸餾的蒸餾水。

    檢驗結束后,所有帶菌的培養基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快滅菌和洗刷。清洗過的器皿不應殘留洗滌劑的痕跡。


    (四)檢驗記錄和結果的報告

    經檢驗的每份樣品都應有完整的檢驗記錄。樣品檢驗過程中所用方法、出現的現象和結果等均要用文字寫出試驗記錄,以作為對結果分析、判定的依據,記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。

    檢驗結束后,根據檢驗結果,及時填寫檢驗報告書,簽字并經負責人審核簽字后發出。


    (五)樣品的微生物檢驗流程

     


    (六)微生物操作注意要點

    無菌操作要求

    (1)微生物實驗室工作人員,必須有嚴格的無菌觀念,許多實驗要求在無菌的條件下進行,主要原因,一是防止試驗操作中人為污染樣品,二是保證工作人員安全,防止檢出的致病菌由于操作不當造成個人污染;

    (2)接種細菌時必須穿工作服、帶工作帽;

    (3)進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應放在無菌室緩沖間,工作前經紫外線消毒后使用;

    (4)接種食品樣品時,應在進無菌室前用肥皂洗手,然后用酒精棉球將手擦干凈;

    (5)進行接種所用的吸管、平皿及培養基等必須經消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用酒精點燃燒灼三次后使用;

    (6)從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及試管或平皿邊;

    (7)接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌活樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒;

    (8)接種環和針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到針和環與桿的連接處;

    (9)吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的吸爾球吸取,不得直接用口吸。

     

    無菌間使用要求

    (1)無菌間應密封,不得隨意打開,并設有與無菌間大小相應的緩沖間及門,另盡量設有小窗,以備進入無菌間后傳遞物品;

    (2)無菌間應保持清潔,工作后用巴氏消毒溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與試驗無關的物品;

    (3)無菌間使用前后應將門關緊,打開紫外燈消毒(30W,1m)時,照射時間不少于30分鐘,使用紫外燈,應注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精球輕輕擦拭,除去上面的灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響;

    (4)處理和接種食品樣品時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。


    消毒滅菌要求

    微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養基、被污染和接種的培養物等,必須經滅菌后方能使用。

    (1)滅菌前準備

    ①所有需經滅菌的物品首先要清洗晾干,玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴密,如用金屬筒應將上面氣孔打開。

    裝培養基的三角瓶塞好棉塞,試管蓋好蓋,用紙包好。

    (2)裝放

    將物品分別包扎好,直接放入消毒筒內,物品之間不能過擠。

    (3)設備檢查

    ①檢查門的開關是否靈活,橡皮圈有無損壞,是否平整。

    ②壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位,蓋好蓋,通蒸氣或加熱后,觀察是否漏氣,壓力表與溫度計所標示的狀況是否吻合,管道有無堵塞。

    ③對有自動電子程序控制裝置的滅菌器,使用前應檢查規定的程序,是否符合于進行滅菌處理的要求。

    (4)滅菌處理

    手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應按下列步驟進行:

    ①高壓鍋內加入清水(重復使用時應將水量補足,水變混濁需要更換)。

    ②將要滅菌的物品放入滅菌鍋內,蓋好蓋子。

    接通電源,加熱,水沸騰后打開放氣閥排氣,直到壓力表指針降到0.05Mpa時,關掉放氣閥。

    指針指到121℃時開始計時,達到要求的滅菌時間關掉開關,冷卻直到壓力降到0.05Mpa即可通過放氣閥緩慢放氣。

    (5)滅菌溫度與時間

    ①不同類型培養基的滅菌溫度與時間的不同。

    ②滅菌處理:滅菌后物品,按正常情況已屬無菌,從滅菌器中取出應仔細檢查,以免再度污染。

    物品取出,隨即檢查包裝的完整性,若有破壞或棉塞脫掉,不可作為無菌物品使用。

    取出的物品,如外包裝有明顯的水浸者,不可作為無菌物品使用。

    培養基或試劑等,應檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態,未達到者應廢棄。

    取出的物品掉落在地或誤放不潔之處,或沾有水液,均視為受到污染,不可作為無菌物品使用。

    取出的合格滅菌物品,應存放于貯藏室或防塵柜內,嚴禁與未滅菌物品混放。

    凡屬合格物品,應標有滅菌日期及有效期限。

    每批滅菌處理完成后,記錄滅菌品名、數量、溫度、時間、操作者。

     

    (6)有毒有菌污物處理要求

    微生物實驗室所用實驗器材、培養物等未經消毒處理,一律不得帶出實驗室。

    經培養的污染材料及廢棄物應放在嚴密的容器或鐵絲筐內,并集中存放在指定地點,待統一進行高壓滅菌。

    經微生物污染的培養物,必須經121℃,30min高壓滅菌。

    染菌后的吸管,使用后放入5%煤酚皂溶液或石炭酸溶液中,最少浸泡24小時,再經121℃,30min高壓滅菌。

    涂片染色沖洗片的液體,一般可直接沖入下水道,染色的玻片放入5%煤酚皂液中浸泡24h后,煮沸洗滌。

    打碎的培養物,立即用5%煤酚皂液或石炭酸噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時后再擦拭干凈。

     

    (7)玻璃器皿的清洗要求

    ①目的  

    為了保證微生物實驗順利進行,保證實驗結果的準確性,不影響實驗進度,必須把器皿徹底清洗干凈。

    ②注意事項

    任何洗滌方法,都不應對玻璃器皿有所損傷,不能用有腐蝕作用的化學藥劑,也不能使用比玻璃器皿硬度大的物品來擦拭玻璃器皿。

    一般新的玻璃器皿用2%的鹽酸液浸泡數小時,后用水沖洗干凈。

    用過的器皿應立即洗滌,放置太久會增加洗滌困難。

    強酸、強堿及其它氧化物和有揮發性的有毒物品,都不能倒在洗滌槽內,以免污染環境水質,必須倒在廢水缸中。

    含有對人體有傳染性病菌的器具,應先煮沸滅菌后再進行洗滌。

    難洗滌的器皿不要與易洗滌的器皿放在一起,以免增加洗滌的麻煩。有油的器皿不要與無油的器皿混在一起,否則使本來無油的器皿沾上了油垢,浪費藥劑和時間。

    洗滌劑的種類:水、洗衣粉、檸檬洗滌劑、肥皂。

     ③洗滌方法

    含有瓊脂培養基的玻璃器皿的洗滌方法:事先應將器皿中的瓊脂刮去,然后用清水洗滌,并用試管刷刷其瓶壁,以除去粘污在壁上的灰塵和油垢。用洗衣粉水洗去油污,然后用自來水(蒸餾水)沖洗。洗好后的器皿應倒置晾干或置于干燥箱中干燥至無水滴。

    載玻片及蓋玻片的洗滌法:新載玻片及蓋玻片先在20%的鹽酸溶液中浸一小時,然后用自來水沖洗2~3次,最后用蒸餾水換洗2~3次。用過的載玻片及蓋玻片,應用紙擦去油垢,再放在5%的洗衣粉水中煮30分鐘后立即用自來水沖洗,然后放在稀的洗液中浸泡2小時,再用蒸餾水沖洗至中性。

    移液管、倒管的洗滌方法:新的移液管及倒管先在的5%鹽酸溶液中浸一小時,然后用自來水沖洗幾次,最后用蒸餾水換洗幾次。用過的移液管、倒管先用自來水洗去表面的殘液,再放在洗衣粉水中浸泡一小時以上,再用自來水沖洗至管內壁無殘渣,最后用蒸餾水換洗次,晾干后入恒溫干燥箱中烘干。

     

    (8)培養基、無菌水的制備

    ①基本原理

    培養基的種類很多,不同微生物所需要的培養基不同。培養基制成后的物理狀態可分為液體、固體、半固體三種類型,我們實驗室常用的是固體培養基。

    ②器材

    三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、藥勺、杜氏小管、硅膠塞(棉塞)、電爐。

    培養基的種類

    營養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發酵培養基、乳糖發酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基等。

    方法步驟

    培養基的制備:

    稱量:根據培養基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中。

    溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻。

    分裝:根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5(需根據試管的大小而定)。液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右。

    塞橡膠(棉)塞:裝好培養基的試管應塞上橡膠(棉)塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發。

    包裝:三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍。

    無菌水的制備:

    用10mL移液管量取9.0mL蒸餾水(稀釋水)裝入試管中。

    用250mL量筒量取225mL蒸餾水(稀釋水)裝入250mL的三角瓶中,可置少許玻璃珠于三角瓶內,塞上橡膠(棉)塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。

     

    (9)設備使用原則

    ①實驗設備的使用由實驗員嚴格按照操作說明書進行,其他人員不得隨意操作。

    ②實驗設備的日常維護保養由實驗員根據設備操作說明書進行,出現不可排除的故障時,經部門總經理批準,商請專業人員維修。

    ③實驗設備應定期進行計量檢測,確保儀器的準確性。

    ④實驗員應愛護儀器設備,使用前應檢查,使用后應及時清理清潔,并定期維護保養,下班前應檢查設備電源是否關閉。

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    編輯:songjiajie2010

     
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