DNA導入哺乳動物細胞常見的方法

名稱

機制

轉染效率

用途

優缺點

影響因素

磷酸鈣轉染法

內吞作用

20%細胞被轉染

瞬時表達

1、簡單有效

2、適用于貼壁、非貼壁細胞

　　3、常作首選方法

1、Ca2 ，DNA濃度

2、PH值，沉淀反應時間

　　3、氯喹，甘油和丁酸鈉處理

DEAE葡聚糖轉染法

抑制核酸酶

內吞作用

在BDC-1，CV-1和COS細胞中較高

瞬時表達

操作簡單

1、需高濃度DNa

2、DEAE葡聚糖濃度

　　3、溫育時間

Poly-brene轉染法

不清楚

低分子量DNA轉染率高于磷酸鈣法

CHO細胞的穩定轉化子

能得到較多的穩定轉化子

1、受體細胞類型

2、轉染調控信號

　　3、DNA濃度

原生質體融合

胞膜融合

50-100%轉染，穩定子得率為0.2-0.02%

瞬時表達

穩定表達

1、操作復雜

2、不能進行共轉染

　　3、慎用于篩選營養缺陷型變異株

1、溶菌酶、PEG濃度

2、溫育時間

電穿孔

高壓在膜上形成微孔

效率較高

瞬時表達

穩定轉化

1、需精密儀器

2、可用于動物、植物細胞和細菌

1、電場強度

2、脈沖長度

　　3、溫度，DNA濃度

　　4、培養液

脂質體

脂膜融合

50-60%轉染

瞬時表達

穩定轉化

1、操作簡單

2、可用于體內試驗

1、脂質體質量

2、DNA濃度

胞核微注射法

直接注射

50-100%轉染

穩定轉化

1、需要特殊儀器

2、處理樣品數量少

　　3、高效

1、注射技術

2、DNA濃度