免疫中和反應技術(Neutralization test technique)：固定血清稀

病毒或毒素與相應的抗體結合后，失去對易感動物的致病力，謂之中和試驗。本試驗主要用于：①從待檢血清中檢出抗體，或從病料中檢出病毒，從而診斷病毒性傳染病；②用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑒定細菌的毒素類型；③測定抗病毒血清或抗毒素效價；④新分離病毒的鑒定和分型，中和試驗不僅可在易感的實驗動物體內進行，亦可在細胞培養上或雞胚上進行。試驗方法主要有簡單定性試驗、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。

本法多將病毒作10倍遞增稀釋，分置2列試管，第一列加正常血清（對照組），第二列加待檢血清（試驗組）。混合后，置37℃作用1h，將各管混合液分別接種選定的試驗動物，每一稀釋度用3～5只動物。接種后，逐日觀察，并記錄其死亡數，觀察結束后，計算LD₅₀和中和指數，本法適用于大量檢樣的檢測。

表 固定血清稀釋病毒法術式

表 固定血清稀釋病毒法中和試驗（例）

注：［1］分母為接種數，分子為死亡數；

［2］LD₅₀計算見實例。

中和指數＝中和組LD₅₀/對照組LD₅₀=10^-2.2/10^-5.5=10^3.3

查3.3反對數是1.995，故中和指數10^3.3＝1.995。也就是說該待檢血清中和病毒的能力為正常血清的1.995倍。本法多用以檢出待檢血清中的中和抗體，對病毒而言，通常中和指數大于50者判為陽性，10～49為可疑，小于10為陰性。