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    手持便攜式熒光檢測儀使用指導

    放大字體  縮小字體 發布日期:2013-08-02  來源:實驗室資訊網
    核心提示:1.目的:實時檢測現場衛生狀況,保證食品安全2.適用范圍:適用于對食品接觸器具和生產環境、加工人員手的消毒效果檢測以及對生產
     1.目的:

    實時檢測現場衛生狀況,保證食品安全

    2.適用范圍:

    適用于對食品接觸器具和生產環境、加工人員手的消毒效果檢測以及對生產過程微生物污染水平的分析、檢測和加工前清潔消毒的評價。

    3. 如何建立一個完善的ATP檢測程序:

    3.1 如何設定ATP檢測標準:

    設定通過,警告,不通過的標準對于實時ATP檢測程序是十分重要的,這些標準依據生產環境,生產產品的種類不同而有所不同,但是設定這類檢測標準的方法是相同的。

    有兩種方法設定ATP檢測標準:1)徹底清潔;2)日常清潔

    徹底清潔通常適用于高潔凈要求的設備表面或易清潔的光滑表面,而日常清潔適用于粗糙和不易清潔的表面。

    1)徹底清潔

    2)日常清潔

    “警告”數據為用戶提供分析和提前預警起到非常重要的作用,當然用戶也可將高于合格線的所有數據設定為不合格,而不設置警告區域

    3)I-Genie通用檢測標準

    I-Genie也為用戶提供了通用檢測標準,這些標準可能不適用您所檢測的目標表面,如需設定自己的檢測標準,請參照1);2).

    I-Genie對于易清潔表面的檢測標準

    I-Genie          

    Pass             

    Caution             

    Fail       

    RLU

    20

    20-40           

    40        

     

    *易清潔表面包括不銹鋼表面或無凹槽平滑的表面,如水池,洗滌桶,刀片,桌面,垃圾桶等

    I-Genie對于難清潔表面的檢測標準

    I-Genie

    Pass

    Caution

    Fail

    RLU

    20

    20-60

    60

     

     *難清潔表面包括有凹槽,裂縫,缺口的表面,如傳送帶,噴嘴,O形環,橡膠管,墻壁等

    I-Genie對于手表面的檢測標準
     

    I-Genie

    Pass

    Caution

    Fail

    RLU

    30

    30-60

    60

     

    ★ 注意:

    如用戶已有控制點菌落總數標準平板計數標準,可將ATP檢測結果與之參照。但請注意ATP是來自于微生物或有機物殘留,所以只能說ATP水平與微生物數目有著密切的相關性,ATP檢測與平板計數結果間不能完全一一對應,但有密切的相關性。

    3.2 檢測表面取樣示例:

    a)規則表面

    用拭子頭涂抹被測區域

    (30-45°角、10×10 CM表面)

    b)不規則表面

    當不能取得10×10 CM表面積時,

    應該盡量涂抹足夠的區域。

    3.3 I-GenieTM手持便攜式熒光檢測儀與CleanSenseTM表面潔凈度檢測試劑盒使用方式:
     

    儀器自檢


     

    取出與所需檢測樣品同等量的檢測瓶,剪開裝有溶解液的滴管,將溶解液小心擠入瓶中,左右來回振蕩檢測瓶促使粉末溶解,并靜置5min。
     

     
    取出采樣棉簽,在所需檢測的物體表面擦拭采樣

    按照圖示的順序進行涂抹

    將已采好樣的采樣棉簽放入熒光酶溶液中,并攪拌,使棉簽表面的待測樣品完全洗入溶液中,此過程約5s。

     將檢測瓶放入i-Genie?手持式便攜ATP熒光檢測儀的檢測池中,蓋上機蓋。檢測并讀數。

    3.4 設置檢測頻率與周期

    a) 檢測時機:

    1)ATP檢測表面應為干燥表面。

    2)一般情況下,ATP檢測應在使用消毒劑使用前進行。

    3)但部分CIP程序需在消毒劑使用后進行ATP檢測,這種情況下,消毒劑的消毒接觸時間為5分鐘-15分鐘。依照消毒使用規范,等待這段時間消毒劑干燥后,再進行表面取樣檢測。

    ★ 注意:可通過高壓蒸汽消毒配合ATP檢測,可有效節省消毒劑的使用。

    b) 取樣、檢測頻率:

    根據資金狀況,選取適合的取樣點數量,推薦以下策略:

    1)ATP檢測應作為抽檢和初篩手段。(結果可疑環節可進一步采樣進行標準平板計數)

    2)檢測方案(僅供參考)

    l    每座車間建立5-10個檢測點。

    l    每個檢測點每周抽檢1-2次。

    l    定期將檢出結果以圖表形式進行總結和報告,為控制措施提供短期評價。

    l    提供季度或年度報告,對更長期數據進行分析。

    3.5 根據ATP快速檢測結果制定糾偏措施
     

    檢測結果

    結果判斷

    檢測值低于合格(Pass)值

    清潔合格

    檢測值介于合格(Pass)值與不合格(Fail)值之間,需要警惕(Caution)

    下次清潔時應特別留意該區域清潔

    檢測值高于不合格(Fail)值

    重新清潔

     

    4. 有關食品安全和衛生檢測的問答

    4.1 哪些因素可能影響食品安全和衛生?

    生物(如細菌總數超標、致病菌污染等)、化學(農藥殘留、有毒添加劑等)、物理(放射污染等)及轉基因產品(有害遺傳效應等)四大因素。其中,以細菌污染食物、飲用水引發食源性中毒最為常見,其危害的范圍最廣。

    4.2 國內外通常采用什么方法進行食品細菌總數和衛生、防疫檢測?

    “常規法”和“ATP熒光快檢法”。常規法是我國衛生部規定至今仍然沿用的方法,因此,又稱“國標法”,即(細菌)活細胞平皿計數法。

    4.3 “常規法”和“ATP熒光快檢法”的共同點和主要差別是什么?

    兩種方法都能用于檢測樣品中的細菌總數,提供有關衛生防疫數據。主要差別在“時效性”,常規法至少要1-2天才能得到結果,快檢法能在1-5分鐘內得到實時檢測數據。

    4.4 為什么兩種方法在“時效性”上有這樣大的差異呢?

    因為它們所依據的基本原理各不相同。“常規法”是讓檢樣中原先看不見的細菌細胞,在稀釋涂布后通過在營養瓊脂培養基上37℃,48小時的保溫培育,這樣,一個活的細菌細胞經多次分裂繁殖形成數以億計,肉眼可見的細菌集群(菌落),然后通過計數得到結果,即菌落形成單位/毫升(克)[CFU/ml(g)]。

    “ATP熒光快檢法”則基于蟲光素酶能催化細菌細胞的ATP發出熒光,熒光檢測儀能快速、準確計量熒光值的原理。因此,檢樣中細菌細胞越多,ATP量就越大,發出的熒光就越強。這樣,在排除檢樣中非細菌ATP干擾的情況下,檢測熒光值(RLU)就能確定細菌的細胞數[CFU/ml(g)]。

    4.5 兩種檢測方法哪一種更準確?兩種檢測方法得到的數據一致嗎?

    在回答這一問題前,讓我們重溫微生物學的兩個基本概念:細菌或微生物對人類生活,生產造成的有利(如用于抗菌素生產)或有害影響(如污染食品、引發疾病)都非單一或少數細菌細胞的作用,而是單位體積內數以十萬、百萬細胞群體的效應。其次在適宜條件下,細菌每20-30分鐘就能分裂繁殖一代。以大腸桿菌為例,10萬個細胞/毫升二小時后就成了640萬細胞/毫升。

    因此,正確的回答是,兩種方法都能滿足特定時期細菌總數檢測和衛生監測的需求,但時效性有重大差異。快檢方法更有利于保障食品安全水平的全面提高。通過常規法和ATP熒光快檢法實際檢測建立一個兩者之間可以互相參照,符合食品安全衛生標準的有效范圍(如合格、警告、不合格)是發達國家的通用做法。

    4.6 在食品安全方面國外有哪些值得借鑒的經驗和措施?

    上世紀90年代后,美、英、日等國就已依據螢火蟲發光原理,研制并推廣使用ATP熒光法快檢設備用于檢測食品細菌總數或衛生防疫監測。這些設備既能提供實時的檢測數據,又有準確、便攜、使用容易等特點。不僅彌補了“常規法”時效性差的不足,又能發揮防患于未然的預警作用。有效地保障了食品安全總體水平的提高,也促進了如HACCP等食品衛生理念的誕生。

    4.7 HACCP認證體系的主要涵義和作用是什么?

    HACCP是“危害分析關鍵控制點”一詞的英語縮寫,源于上世紀70年代美國太空總署提出的有關食品安全基本理念,即(1)危害食品安全的可能因素包括生物(轉基因產品)、化學、物理四個方面;(2)從原料到食品通常經歷加工生產-產品包裝、儲存、運輸-配發銷售等環節;(3)食品原料的品質、生產環境、設施、操作人員的衛生水平都將影響終產品-食品的安全衛生水平。因此,只有將所有可能影響食品安全的危害因子全部納入監控范圍,采用快檢方法實施監控才能從源頭開始,從而有效地保障食品,并留有補救時間防患于未然。

    美、日、歐盟等國已將實施HACCP認證體系列為法定措施。我國衛生部已于2002年頒發《食品加工企業的HACCP實施指南》[衛法監發174號]。

    4.8 “ATP熒光快檢法”和實施食品安全的HACCP預警、溯源管理制度有何關系?

    在建立和推廣使用ATP熒光法快檢技術前,只能靠目測或平皿計數法評估產前或清潔消毒后生產線、食品接觸表面的衛生水平。這兩種方法要不是靈敏度不夠,就是取得結果的時間太長,無法滿足生產的實際需要。換一句話說,只有采用ATP熒光法快檢一類方法才能實施HACCP和食品安全的溯源和預警制度。

    4.9 美、日、歐盟各國如何評價ATP熒光快檢法和建立相關檢測標準?

    通過ATP熒光快檢法得到的是來自食物殘渣和微生物細胞兩個部分ATP的總值。多數情況下,來自微生物細胞的比例較小。但是,由于食物殘渣既是微生物生長的培養基,又起抵消滅菌效果的作用。因此,關鍵在確定避免重新污染的ATP臨界值,而非單純依據細菌細胞ATP值折算的細菌菌落數(cfu)。這就是多數衛生監測試劑盒不設置通用ATP標準,也不必期望ATP與CFU之間有確定相關關系,容易引起初用者疑慮的原因。統計結果證實,凡ATP熒光法顯示衛生水平改善,則平皿計數結果也一定改善。如果檢測點ATP水平高,即便是無菌的,次日早上必然大量滋生細菌導致食品污染。

    因此,發達國家的普遍做法是:首先通過ATP快檢步驟對食品原料及經過清潔、消毒后食品原料接觸表面是否達到衛生標準作出有數字依據的評價。其次,對易于引發微生物污染的關系部位實施重點監控。最后,制訂出符合本單位情況,又符合衛生要求的ATP數值范圍。

    4.10 具備什么條件有利于在我國普遍實施HACCP認證體系?

    (1)發展擁有我國自主知識產權的食品安全關鍵技術,提供準確、有效、便攜、操作容易、價格能為國內廣大用戶接受的食品安全檢測設備和試劑系統。

    (2)建立與快檢技術相匹配的國家、企業檢測標準。

    (3)普及與快檢技術相關的衛生學和衛生監督指導新理念、新知識。

    5. ATP快速檢測綜合示意圖


     

    編輯:songjiajie2010

     
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    關鍵詞: 熒光檢測儀 溶解液
     

     
     
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